400-606-0451
引物最好在模板 cDNA 的保守区内设计,保守区是不同物种同一基因的相同序列DNA 序列。引物长度一般在15 ~ 30bp之间。引物长度常用的是18 ~ 27bp,过长会导致其延伸温度大于74℃,不利于PCR反应。
本着保密原则,测序样本我们会为您保留一个月,所以如果想加测需要在一个月内进行,否则需要重新送样。
导致该情况的因素较多,如同一物种,在不同的种族或个体之间,其基因序列可能会存在差异。另外,PCR过程中的错配也是因素之一。我们提供的结果是客户样品序列的真实结果,因此无法保证与参考序列完全一致,请理解。
PCR反应过程中会出现错配现象,这些错配分布在PCR产物的不同位置,所以我们得到的PCR产物是许多携带不同位置错配片段的混合物。PCR产物直接进行测序
一般情况下,如果序列较长,得到的测通序列都是拼接的结果,拼接的部分是第一个反应的末端和第二个反应的前端,这一部分往往会有杂带,我们会以信号好的为主,信号弱的作为参考,但也不是绝对的。
基因组中通常存在一些不明原因的复杂结构,如回文序列和发夹结构等,这些结构的存在会导致信号的突然减弱或中断;另一种情况是DNA碱基排列并没有异常,而是DNA整体出现复杂的结构,这样将导致测序根本无法进行。