400-606-0451
原因一:这可能是因为您在构建载体的时候插入片段是非定向的,这种情况一般在T/A克隆的时候比较常见。
TE溶液中的EDTA对PCR反应有一定的抑制作用,实际上DNA测序是在PCR反应过程中进行的,想要得到一个理想的测序结果,首先需要一个最佳的PCR反应条件。因此,在准备DNA测序样品时,建议您使用灭菌水进行溶解。
这是因为体系中残存的染料单体干扰测序反应形成的双峰所致;此外,测序初始阶段电压不稳定,导致引物后面有20-50bp的碱基读不清楚。
pcr产物:如果以PCR产物的形式送样,建议将PCR产物切胶回收后再送测序,这样可以在一定程度上避免重叠峰的出现。